抽象
目的
目的s were to develop new means to isolate useful numbers of primary progenitor
细胞并定量分析成红细胞的逐步成熟。
方法
方法包括给小鼠服用甲砜霉素(TAP)以产生分阶段的
前红系细胞;优化其EPO依赖的体外生长条件
和生存;开发CFU-E成熟的检测方法;分析特定阶段的成绩单
表达;并在转基因中表达异源的类红细胞特异性标签(EE372)
mice.
结果
每只TAP治疗的小鼠3×10
7 产生高度EPO反应性的类红细胞祖细胞,该细胞代表
高达总脾细胞的30%,并且对生存,生长,生长,
和即时反应基因表达。在这个不断发展的队列中,
观察到基因表达的顺序,并且最大表达c-kit,EPO受体,
TAP撤离后72、96和120小时分别发生β和珠蛋白的转录。
另外,新发现的类红细胞特异性双特异性激酶DYRK3
显示在CFU-E晚期表达。在体外,这些祖细胞成熟
从高FALS Ter119逐步
−
细胞(24小时培养)至高FALS Ter119
+
细胞(24–36小时)至低FALS Ter119
+
成熟的成红细胞(40-48小时)及其形态存在明显差异
被观察。最后,基于MACS的红细胞祖细胞的纯化程序
还开发了来自TAP处理的EE372转基因小鼠的细胞。
结论
全面的新系统可分离大量原代鼠类红细胞
建立祖细胞并定量监测其发育,
应在研究内源性和药理学调节剂方面发挥良好作用
红细胞发育。
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文章信息
出版历史
公认:
July 6,
2001
收到的修订版:
June 10,
2001
收到:
February 7,
2001
身份证明
版权
©2001国际实验血液学会。由Elsevier Inc.出版。保留所有权利。