强调
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使用Cre-loxP系统在人iPSC中设计了16 Mb chr7q缺失。
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使用CRISPR / Cas9设计了百万碱基级的间质性和末端chr7q缺失。
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删除12-Mb区域7q32.3–7q35可复制del7q MDS-iPSC表型。
在血液学中经常发现跨越几个兆碱基的复发性染色体缺失
恶性肿瘤。对模型系统中的删除进行工程设计以进行功能研究的能力
它们对表型的影响将首先确定是否给定
缺失是致病性或中性的，其次是鉴定关键基因。
不完整的同构使建模或删除巨型碱基规模的挑战变得困难或不可能
在小鼠或其他模型生物中。此外，尽管在针对性方面有所突破
核酸酶技术，近年来，以百万碱基为单位的缺失工程仍然存在
具有挑战性，在正常的二倍体人类细胞中尚未实现。大量删除
骨髓增生异常综合征中7号染色体长臂（chr7q）的频繁发生
（MDS）且预后不良。我们之前发现可以建模
使用修饰的Cre-loxP在人诱导的多能干细胞（iPSC）中的chr7q缺失
战略。但是，此策略无法控制长度和边界
通过随机染色体断裂引发的工程缺失。
在这里，我们开发了能够生成确定的和精确的染色体的策略
使用两种不同的策略可删除高达22 Mb的片段：“经典” Cre-loxP重组
和CRISPR / Cas9介导的DNA切割。作为原理的证明，我们说明了表型
体外分化后衍生自这些iPSC的造血功能的表征
允许进一步定义其半合子性受损的chr7q关键区域
造血分化潜能。我们在这里提出的策略可以广泛地
适用于工程化人类细胞中的各种染色体缺失。
图形概要
参考文献
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文章信息
出版历史
在线发布：2020年6月12日
公认：
6月5日，
2020
收到的修订版：
6月4日，
2020
收到：
4月1日，
2020
身份证明
版权
©2020 伊势 -血液学和干细胞协会。由Elsevier Inc.发布
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